巨噬細胞集落刺激因子（M-CSF）是一種19.02kDa的造血生長因子，含有162個氨基酸殘基。該蛋白的活性：形式為同源二聚體，由成骨細胞分泌。M-CSF可控制單核細胞、巨噬細f胞和骨髓祖細胞的生成、分化和功能。M-CSF能夠通過結(jié)合其受體CSF-1R激活 CSF-1信號通路。
一、體外細胞培養(yǎng)應(yīng)用
原代巨噬細胞誘導：
推薦濃度20ng/ml，與RANKL（30ng/ml）聯(lián)用可誘導破骨細胞分化
培養(yǎng)體系需含10%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)基，37℃ CO?條件下培養(yǎng)
細胞系維持：
維持培養(yǎng)時建議5-10ng/ml，每2-3天換液
貼壁細胞傳代前需用含EDTA的胰酶消化
二、體內(nèi)實驗應(yīng)用
皮下注射方案：
常用劑量100-200μg/kg，每日1次連續(xù)3天
注射部位建議選擇肩胛骨間區(qū)或腹股溝
腹腔注射方案：
適用于快速動員，劑量可調(diào)整至50μg/kg
需確認無菌操作，避免腹腔感染
三、質(zhì)量控制要點
活性驗證：
建議通過CCK-8法檢測細胞增殖活性（EC50約5-10ng/ml）
流式檢測CD11b和F4/80表達驗證分化效率
儲存條件：
凍干粉4℃可保存1個月，-20℃長期保存
溶解后分裝保存，避免反復凍融
四、注意事項
無菌操作：
所有操作需在生物安全柜內(nèi)進行
建議使用0.22μm濾膜過濾
劑量調(diào)節(jié)：
首次使用建議進行劑量梯度測試（5-50ng/ml）
高濃度可能誘導細胞凋亡
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